Sarrera

Gaur egungo laborategi biomediko eta kimikoetan,Botatzeko kultura-hodiak oso erabiliak dira zelula-kulturan, erreakzio kimikoetan, laginen kontserbazioan eta beste eragiketa kritiko batzuetan.Ezin da alde batera utzi prozesu esperimentalean duten garrantzia. Kultura-hodi hauek lagin esperimentalekin kontaktu zuzenean daudenez, haien materialak, tamainak, itxierak eta esterilizatuta dauden ala ez ere eragin handia izango dute emaitza esperimentaletan. Hautaketa desegokiak kutsadura gurutzatua, lagin-galera edo datu esperimentalen alborapena ekar dezake, eta horrek ikerketaren zehaztasunean eta erreproduzigarritasunean eragina izan dezake.

Botatzeko Kultura Hodien Mota Nagusiak

Botatzeko kultura-hodi sorta zabala dago, eta ikertzaileek mota egokia aukeratu behar dute esperimentuaren helburuaren, funtzionamendu-ingurunearen eta laginen ezaugarrien arabera. Hiru alderdi hauetan sailkatzen dira: materiala, edukiera eta funtzio berezia:

1. Materialaren araberako sailkapena

Material ezberdinez egindako botatzeko kultura-hodiak tenperatura-erresistentzian, egonkortasun kimikoan eta propietate optikoetan desberdinak dira:

• Polipropilenoae: Tenperatura altuekiko eta korrosio kimikoarekiko erresistentzia ona, zelula-kultura arruntetarako, biologia molekularreko esperimentuetarako eta beste aplikazio batzuetarako egokia.
• PoliestirenoaGardentasun handia, likidoaren eta zelulen egoera erraz behatzeko modukoa, normalean proba optikoetan erabiltzen da, baina ez da tenperatura altuko erresistentzia, normalean ezin da autoklabean garbitu.
• Beirazko kultura-hodiakBerrerabilgarriak eta kimikoki egonkorrak diren arren, garestiak dira, garbiketa eta esterilizazio prozedura gehigarriak behar dituzte eta kutsadura gurutzatuaren arriskua dute.

2. Edukieraren araberako sailkapena

Esperimenturako behar den lagin-bolumenaren arabera, kultura-hodien edukiera mikrobolumenetik bolumen handietara bitartekoa da:

• Mikrozentrifugazio hodiak: laginak banatzeko, prezipitazio zentrifugoetarako, DNA/RNA erauzteko eta beste eragiketa batzuetarako erabili ohi da.
• Kultura-hodi estandarrak: laborategian gehien erabiltzen den edukiera, zelula-kulturarako, nahasketa-erreakzioetarako, laginen kontserbaziorako eta beste helburu batzuetarako egokia.
• Kultura-hodi handiko edukieraZelula-kultura eskala handiko edo disoluzio-kantitate handiko prozesatzeko egokia.

3. Funtzio berezien araberako sailkapena

Hodiak hainbat ezaugarri gehigarrirekin daude eskuragarri, esperimentu-beharrizan espezifikoak asetzeko:

• Hodi aseptiko aurrez esterilizatuak: gamma erradiazioz edo autoklabez esterilizatua fabrikan, asepsi-eskakizun handiak dituzten esperimentuetarako egokia.
• Kartutxoaren tapoiarekin.: gasen trukea ahalbidetzen du, aireztapena behar duten mikroorganismo edo zelula-lerroentzat egokia eta kanpoko iturrietatik datorren kutsadura saihesten du.
• Tenperatura baxuko hodi erresistenteakSegurtasunez erabil daiteke -80 ℃-tan edo nitrogeno likidoaren ingurunean ere, lagin biologikoak tenperatura baxuetan epe luzera kontserbatzeko egokia.
• Hodi graduatuak/graduatu gabeakHodi graduatuak komenigarriak dira likido-bolumena azkar kalkulatzeko eta banatzeko, esperimentuen eraginkortasuna hobetzeko.

Kultura-hodiak aukeratzeko faktore nagusiak

Esperimentuen diseinu eta funtzionamendu prozesuan, erabilera bakarreko kultura-hodi egokiak aukeratzea funtsezkoa da esperimentuen eraginkortasuna eta emaitzen zehaztasuna bermatzeko. Ikertzaileek hainbat faktore gako kontuan hartu beharko lituzkete sakonki:

1. Esperimentu mota

Kultura-hodien eskakizunak nabarmen aldatzen dira esperimentu batetik bestera eta eragiketaren edukiaren eta esperimentu-ingurunearen arabera aukeratu behar dira:

• Zelulen kulturarako.Esterilitate-eskakizunak oso altuak dira, eta gas-trukea bermatzeko, kartutxo-tapoi transpiragarriak dituzten hodi esterilak erabiltzea gomendatzen da.
• PCR / biologia molekularreko esperimentuakDNA entzimarik, RNA entzimarik eta pirogenorik gabeko hodirik gabe egon behar da, askotan polipropilenozko hodi garbiak erabiltzen dira.
• Tenperatura baxuko biltegiratzeaTenperatura baxuetan lisia saihesteko, tenperatura baxuetan erresistentzia ona duten hodiak erabili behar dira.

2. Laginaren ezaugarriak

Laginaren propietate fisiko-kimikoek zuzenean eragiten dute kultura-hodien materialaren aukeraketa eta konfigurazio funtzionala:

• Lagin likidoak edo solidoak: behar den bolumena eta hodiaren irekiduraren forma zehazten du.
• Lagin azidoak edo alkalinoak: lagin oso korrosiboek material kimikoki erresistenteak behar dituzte hodiaren deformazioa edo kutsadura saihesteko.
• Argia saihestu ala ezArgiarekiko sentikorrak diren laginentzat anbar koloreko edo material opakoko kultura-hodia aukeratu behar da, fotodegradazioa saihesteko.

3. Esterilizazio-baldintzak

Esterilizazio beharra eta erabilitako esterilizazio mota dira hodiak aukeratzerakoan kontuan hartu beharreko faktore nagusiak:

• Aurre-esterilizazioa vs. auto-esterilizazioaFabrikan aurrez esterilizatutako produktuak egokiak dira errendimendu handiko esperimentuetarako, denbora aurreztuz; laborategiak autoklabe bidezko esterilizazio ekipamendua badu, autoklabe bidez garbitu daitezkeen PP hodiak aukera ditzakezu.
• Esterilizazioaren bateragarritasunaAdibidez, PS materiala ez da egokia autoklaberarako eta behin bakarrik erabiltzeko da.

4. Bateragarritasuna

Hodiak ondo egokituta egon behar dira laborategiko ekipamendura funtzionamendu egokia eta emaitza fidagarriak bermatzeko:

• Zentrifugoen bateragarritasunaZentrifugaziorako erabiltzen diren hodiak egituraz sendoak izan behar dira biraketa-abiadura handietan indar zentrifugoak jasateko.
• Automatizazioaren bateragarritasunaPipetatzeko robotak, dosifikazio sistema automatizatuak eta abar erabiltzea behar duten esperimentuetarako, hodi tamaina estandarizatuak erabili behar dira.

5. Kostua eta iraunkortasuna

Kostuen eta baliabideen kontsumoaren kontrol arrazoizkoa ere kontuan hartu beharreko alderdi garrantzitsua da esperimentu-beharrak asetzeko:

• Botatzekoak vs. berrerabilgarriakBotatzeko hodiak erraz maneiatzen dira eta kutsadura saihesten dute, errendimendu handiko esperimentuetarako egokiak; berrerabilgarriak diren beirazko hodiak aurrekontu mugatua duten oinarrizko esperimentuetarako egokiak dira.
• Erosketa-eskalaBolumen handiko erosketak unitateko prezioa murriztu dezake, epe luzerako eta eskala handiko proiektuetarako egokia; eskala txikiko eta pertsonalizatutako zehaztapenak malguagoak dira, baina kostu nahiko altua dute.

Aplikazio Ohikoen Eszenatokietarako Gomendioak

Esperimentu mota desberdinen behar espezifikoen arabera, honako erabilera bakarreko kultura-hodi hauek gomendatzen dira hainbat aplikazio-egoera arruntetarako, esperimentuen eraginkortasuna eta fidagarritasuna hobetzeko helburuarekin:

1. Zelulen laborantza

• Gomendatutako motapolipropilenozko kultura-hodi esterilak, kartutxo-tapoi transpiragarriekin
• ArrazoiaPolipropilenozko materialak inertzia kimiko eta biobateragarritasun ona du, zelula-kulturako fluidoetarako egokia. Kartutxoaren estalkiak gas-trukea eraginkorra lor dezake, kutsadura mikrobianoa saihestu eta zelulen ugalketarako beharrezko gas-ingurunea bete dezake.

2. PCR/qPCR molekularen gauzatzea

• Gomendatutako motaknukleasarik eta pirogenorik gabeko PCR hodi espezializatuak edo mikrozentrifugazio hodiak
• ArrazoiaPolipropilenozko hodiek, tratamendu zorrotz baten ondoren, laginaren degradazioa edo kutsadura eraginkortasunez saihestu dezakete, anplifikazio emaitza zehatzak eta fidagarriak bermatzeko. Horma meheko diseinua gomendatzen da bero transferentziaren eraginkortasuna hobetzeko.

3. Tenperatura baxuko biltegiratzea

• Gomendatutako motaTenperatura baxuen aurkako polipropilenozko hodiak, izozte-kontrako pitzadura-diseinuarekin eta torloju-zigiluko tapoiarekin
• ArrazoiaHodi hauek -80 °C-tan edo nitrogeno likidoan ere laginak denbora luzez gordetzeko erabil daitezke, eta egitura bereziak hodia hauskorra izatea eta laginaren isuria eragozten du. Zelula-lerroak, odol-laginak, proteinak edo azido nukleikoak epe luzerako gordetzeko egokiak dira.

4. Zentrifugatzailea

• Gomendatutako motaktolerantzia handiko polipropilenozko hodiak, hondo biribil edo koniko diseinua, zentrifugazio errotoreekin
• ArrazoiaPP hodiek erresistentzia zentrifugo ona dute eta indar zentrifugo handiak jasan ditzakete deformaziorik edo hausturarik gabe. Hondo konikoak zelulak edo prezipitatuak erdigunean biltzen eta berreskuratze-tasa handitzen laguntzen du.

Ohiko akatsak eta saihesteko moduak

Praktikan, noizean behin, kultura-hodien hautaketa desegokiaren ondoriozko porrot esperimentala gertatzen da. Hainbat akats ohiko eta irtenbideetarako iradokizunak behean zerrendatzen dira ikertzaileen erreferentzia gisa:

1. Autoklabean garbitzeko tenperatura altuak jasaten ez dituzten materialen erabilera okerra